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人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒的顯色技術(shù)

更新時(shí)間:2017-05-16      瀏覽次數(shù):1709

人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒簡(jiǎn)介

β2-微球蛋白(β2-microglobulin,BMG)分子量為11800,存在于所有有核細(xì)胞的表面,特別是淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞,并由此釋放入血循環(huán)。它是細(xì)胞表面人類淋巴細(xì)胞抗原(HLA)的β鏈(輕鏈)部分(為一條單鏈多肽),分子內(nèi)含一對(duì)二硫鍵,不含糖。半壽期約107分鐘,可透過腎小球,但尿僅有濾過量的1%,幾乎*可由腎小管回收。β2-微球蛋白在腎功能衰竭、炎癥及腫瘤時(shí),血漿中濃度可升高。主要的研究應(yīng)用在于監(jiān)測(cè)腎小管功能。特別用于腎移植后,如有排斥反應(yīng)影響腎小管功能時(shí),可出現(xiàn)尿中BMG排出量增加。在急性白血病和淋巴瘤有神經(jīng)系統(tǒng)浸潤(rùn)時(shí),腦脊液中BMG可增高。因含量微,常用放射免疫方法測(cè)定,正常血漿BMG參考值為1.0-2.6μg/L,尿中0.03-0.37mg/d。

人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒的顯色比色技術(shù)

顯色

  顯色是ELISA試驗(yàn)中zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。適當(dāng)提高溫度,有助于加速顯色。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。在定量檢測(cè)中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。ELISA顯色結(jié)果通過酶標(biāo)儀進(jìn)行,可減少實(shí)驗(yàn)誤差,提高臨界值樣本的分析準(zhǔn)確度。盡量避免肉眼直接判斷結(jié)果,因?yàn)椴煌瑐€(gè)體的視覺存在差異。應(yīng)注意,加顯色劑時(shí),要保持顯色劑不外流。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生較多氣泡,否則可能使假陽性結(jié)果的出現(xiàn)概率增加。

比色

  比色的方法有目視法和酶標(biāo)比色法2種。目視法簡(jiǎn)單明了,但對(duì)同一標(biāo)本,操作者的不同有時(shí)會(huì)出現(xiàn)不同的結(jié)果,具有一定的主觀性。比色的結(jié)果通常用光密度表達(dá),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度表達(dá)。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預(yù)熱儀器15~30min,使測(cè)得結(jié)果更為準(zhǔn)確。比色前,應(yīng)先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標(biāo)比色儀的比色架上。綜上所述,的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。在實(shí)際應(yīng)用過程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格仔細(xì)的核查,盡量避免假陽性和假陰性反應(yīng)的出現(xiàn),保證檢測(cè)結(jié)果真實(shí)可靠,為研究診斷和疾病防治提供可靠的理論依據(jù)。

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